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神经元细胞信号传导蛋白质14-3-3ζ编码基因的扩增和克隆

安徽医科大学学报 2001 03 170-173     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金资助项目 (编号 98436 32 9)

作者:祖莹,沈继龙,汪学龙

关键词:克亚二氏综合征/遗传学;;信号肽类;;克隆,分子

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2001.03.002

〔摘 要〕 目的 克隆神经元信号传导蛋白质 14 3 3ζ编码基因 ,以研究其在人神经退行性病变中的诊断价值、细胞信号传导过程中的作用及对细胞分裂、细胞凋亡的影响。方法 提取人脑胶质瘤细胞总mRNA ,以其为模板逆转录合成cD NA第一链 ,设计合成引物 ,用PCR扩增 14 3 3ζ基因编码序列 ,将其插入 pGEM T载体 ,并用双酶切和以质粒为模板的PCR进行鉴定。结果 RT PCR扩增出一条约 75 0bp大小的特异性条带 ,重组质粒的双酶切和以质粒为模板的PCR获得了一条与RT PCR大小相同的条带。经DNA测序证明所克隆的DNA片段与GenBank收录序列一致。结论 信号传导蛋白质 14 3 3ζ重组 pGEM T克隆载体的成功构建 ,为进一步研究提供了条件。