基金项目: 中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(编号:2020-PT330-003);;国家重点研发计划项目(编号:2016YFC1303601);;兵团财政科技计划项目(编号:2020CB002);;石河子大学成果转化与技术推广计划项目(编号:CGZH201704)
作者:邵生辉;张健;彭雅琼;向辉;赵敏;谢元茂;郑勇;陈卫刚;
关键词:长链非编码RNA;;ANO1-AS1;;食管鳞癌;;增殖;;凋亡
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.10.013
〔摘 要〕 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)钙离子激活氯离子通道蛋白1反义RNA1(ANO1-AS1)对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法 在ESCC细胞TE-1和EC109中转染沉默ANO1-AS1慢病毒,qRT-PCR检测其和钙离子激活氯离子通道蛋白1(ANO1)表达情况。CCK-8实验和平板克隆形成实验检测增殖能力;通过LinkedOmics数据库获取ANO1正相关表达基因集并进行通路富集及可能通路的验证;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、抑癌基因P53蛋白、促凋亡蛋白(Bax)、抑凋亡蛋白(Bcl-2)、ANO1蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路相关蛋白的表达情况。结果 转染沉默慢病毒后,ANO1-AS1的表达减低(P<0.05);与阴性对照组相比,下调ANO1-AS1后ESCC细胞增殖能力降低(P<0.05),克隆形成率下降(P<0.05);Western blot结果显示,实验组PCNA和Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),P53和Bax蛋白表达升高(P<0.05),通路蛋白PI3K和Akt的磷酸化水平降低(P<0.05)。结论 沉默ANO1-AS1可能通过影响PI3K/Akt通路活性从而降低ESCC细胞的增殖能力并促使其发生凋亡。