基金项目:
作者:邢星;成少平;熊鹰;黄知刚;邓昊;
关键词:
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.09.008
〔摘 要〕 目的 探讨miR-181c-5p对前列腺癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法 通过TCGA数据库中前列腺癌数据分析BIRC5、miR-181c-5p与前列腺癌病理关系,采用miRNA靶基因预测数据库分析miR-181 c-5p与BIRC5靶结合位点并使用双色荧光素酶活性实验证,Western blot检测miR-181c-5p过表达细胞中BIRC5蛋白表达。以前列腺癌细胞PC3、DU145为研究背景,构建miR-181c-5p过表达细胞系(miR-181c-5p组)及其阴性对照(miR-NC组)并用qRT-PCR验证,CCK-8法检测细胞增殖情况[450 nm处光密度值(OD450nm值)],流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western blot检测细胞增殖、凋亡相关蛋白表达。建立miR-181c-5 p/BIRC5双过表达调细胞系(miR-181c-5p+BIRC5组),用上述相同方法检测细胞生长、细胞周期分布、细胞凋亡率及相关蛋白表达。结果 BIRC5在前列癌组织表达升高且在肿瘤高侵犯程度、淋巴节转移和复发患者呈现更高表达趋势,BIRC5高表达患者生存情况较差;miR-181c-5p在列腺癌癌组织表达降低,miR-181c-5p水平与BIRC5水平呈负相关,miR-181c-5p靶向抑制BIRC5表达。在PC3、DU145细胞中,miR-181c-5p组细胞miR-181c-5p水平高于miR-NC组(P<0.05),OD450nm值和S期细胞百分比低于miR-NC组(P <0.05),G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率和BAX、caspase-3、PARP蛋白表达高于miR-NC组(P <0.05),CDK2、CCNB1、BCL-2蛋白表达弱于miR-NC组(P <0.05)。miR-181c-5p+BIRC5组细胞的BIRC5蛋白表达和OD450nm值高于miR-181c-5p组(P<0.05),G0/G1期细胞百分比低于miR-181c-5p组(P<0.05),S期细胞百分比高于miR-181c-5p组(P<0.05),细胞凋亡率低于miR-181c-5p组(P<0.05),CDK2、CCNB1和BCL-2蛋白表达高于miR-181 c-5p组,BAX、caspase-3、PARP蛋白表达低于miR-181c-5p组。结论miR-181-5p可以靶作用BIRC5抑制人前列腺癌细胞增殖,使细胞周期在G0/G1期阻滞,促进细胞凋亡。