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白头翁皂苷B4通过NOS3-DHFR轴对口腔扁平苔藓上皮细胞谷氨酰胺代谢的影响及作用机制

安徽医科大学学报     字体:

基金项目: 河北省中医药管理局科研计划项目(编号:2021071);

作者:李敏、杨梦华、高毅、张子建、江丹

关键词:白头翁皂苷B4;一氧化氮合酶3;二氢叶酸还原酶;谷氨酰胺代谢;口腔扁平苔藓;

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.11.010

〔摘 要〕 目的 探究白头翁皂苷B4(AB4)通过一氧化氮合酶3(NOS3)-二氢叶酸还原酶(DHFR)轴对口腔扁平苔藓(OLP)上皮细胞谷氨酰胺代谢的影响及其作用机制。方法 生物信息学分析OLP的分子靶点、AB4的分子靶点与谷氨酰胺代谢相关基因交集。使用脂多糖(LPS)诱导人口腔角质细胞HOK-16B构建OLP细胞模型。将HOK-16B细胞分为7组:Ctrl、OLP、AB4、OLP+oe-N OS3、OLP+sh-NOS3、OLP+sh-NOS3+oe-DHFR、OLP+sh-NOS3+AB4组,细胞计数试剂盒8 (CCK-8)检测细胞增殖;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定试剂盒检测细胞上清液中炎性因子白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度,试剂盒测定谷氨酰胺摄取量与谷氨酸生成量;蛋白质印迹测定Na依赖性谷氨酰胺载体2(ASCT2)与谷氨酰胺合成酶(GLS)蛋白表达。结果 生物信息学分析OLP、AB4的分子靶点与谷氨酰胺代谢相关基因,共得到3个交集靶点,分别为NFE2L2、NOS1、NOS3。...