〔摘　要〕 目的 探讨TYRO蛋白酪氨酸激酶结合蛋白(TYROBP)是否通过细胞外信号调节激酶(ERK)通路影响糖尿病肾病(DKD)的进展。方法 生物信息分析鉴定DKD关键基因,免疫组织化学染色和实时定量PCR(qPCR)验证DKD小鼠模型以及高糖(HG)刺激的NRK-52E细胞中TYROBP表达水平。通过慢病毒转染,构建稳定过表达/沉默TYROBP及其空载(ev)/随机序列(ss)对照的NRK-52E细胞模型,分别采用5.5 mmol/L葡萄糖浓度和30.0 mmol/L葡萄糖浓度干预72 h,模拟正常糖(NG)、HG环境;将含有终浓度为3.5μmol/L FR180204的HG培养基作为ERK抑制剂干预;实验分为7组:ev+NG组、ev+HG组、oe-TYROBP+HG组、ss+NG组、ss+HG组、sh-TYROBP+HG组、sh-TYROBP+HG+ERK抑制剂组。Western blot检测各组细胞中磷酸化细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(p-ERK/ERK),凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax),上皮间质转化(EMT)相关蛋白钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白α-SMA)表达水平。通过四甲基罗丹明乙酯(TMRE)以及异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色,使用流式细胞术检测细胞线粒体膜电位及凋亡水平。结果 生物信息分析TYROBP作为DKD的关键基因,体内以及体外验证DKD模型中TYROBP mRNA水平增加。HG模型结果显示,与ev+NG/ss+NG组比较,ev+HG/ss+HG组p-ERK/ERK表达增加,线粒体膜电位降低,凋亡水平增加,EMT水平增加。扰动TYROBP的NRK-52E细胞模型结果显示,与ev+HG组比较,oe-TYROBP+HG组PERK/ERK表达降低(P <0.01),线粒体膜电位增加(P<0.05),细胞凋亡水平减少(P<0.001),EMT水平降低;与ss+HG比较,sh-TYROBP+HG组p-ERK/ERK表达增加(P<0.001),线粒体膜电位降低(P <0.01),凋亡水平增加(P<0.001),EMT水平增加;与sh-TYROBP+HC比较sh-TYROBP+HG+ERK抑制剂组中p-ERK/ERK表达降低(P <0.01),线粒体膜电位增加(P <0.001),细胞凋亡水平减少(P <0.001),EMT水平降低。结论 TYROBP可能通过抑制ERK信号通路,降低HG情况下NRK-52E细胞凋亡以及EMT相关蛋白的水平,增加肾小管上皮细胞线粒体膜电位水平继而抑制DKD的进展。