〔摘　要〕 目的 通过构建睾丸体外共培养体系来验证Ddit3-Trib3-Akt信号通路与大鼠精子发生相关。方法 取20～25 日龄雄性大鼠摘取睾丸组织块置于体外培养体系中，每隔2～3d更换1次培养液。利用PCR验证各级生精细胞的标记基因。利用RNA干扰技术验证信号通路Ddit3-Trib3-Akt与大鼠精子发生的相关性。结果 该共培养体系可在体外连续培养超过2.5月，PCR结果显示精原细胞、精母细胞和精子细胞特异标记基因均有表达。利用RNA干扰技术，分别抑制Ddit3和Trib3后，Trib3和Akt基因的RNA和蛋白表达变化证明Ddit3-Trib3-Akt信号通路在大鼠精子发生中存在。结论 该培养体系能够短暂维持干细胞的增殖和分化，在简单的体系上同时实现了维持与稳定的精子发生。Ddit3-Trib3-Akt信号通路的成功验证也证实该培养体系可用于体外研究精子发生的可能分子机制。