基金项目: 中央高校基本科研业务费专项资金资助北京中医药大学重点攻关项目(编号：2020-JYB-ZDGG-127);;国家重点研发计划资助项目(编号：2018YFC1705102);;首都卫生发展科研专项项目(编号：2018-1-4201)
作者：林事成;刘殿娜;庄垚雪;梁天宇;王潇凡;胡凯文;李泉旺;
关键词：冷冻消融;;肺腺癌;;细胞凋亡;;小鼠
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.06.022
〔摘 要〕 目的 探究冷冻消融治疗对肺腺癌细胞凋亡的影响。方法 根据冷冻消融术后肿瘤组织局部变化，在细胞水平上建立肺癌冷冻消融模型。传代培养人肺癌H1299细胞株，将细胞分为4组：A组，未处理细胞，为对照组；B组，未处理细胞培养液中加入坏死液(将细胞悬液放入液氮罐中冷冻5 min, 37℃复温后离心取上清液，得到坏死液);C组，亚致死细胞(细胞在-80℃环境中冷冻7 min,模拟亚致死状态);D组，亚致死细胞培养液中加入坏死液。24 h后用流式细胞术检查冷冻消融对肺癌细胞凋亡的影响，qRT-PCR和Western blot检测冷冻消融对凋亡相关分子B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)及Bcl-2相关x蛋白(Bax)表达的影响。采用Lewis肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型，造模成功的小鼠随机分成2组，假手术组和冷冻消融组，每组4只，氩氦刀冷冻14 d后，取肿瘤组织，通过qRT-PCR和Western blot检测冷冻消融对凋亡相关分子Bax及Bcl-2表达的影响。结果 细胞冷冻模型中与对照组A组相比，B、C、D组均能促进细胞凋亡(P