基金项目: 江西省自然科学基金青年基金项目(编号:20232BAB216 008);中国国家留学基金项目(编号:202506820050)~~
作者:何蕾;孙兴兰;吴应兴;许源;彭翔;胡晨恺;
关键词:氧糖剥夺/再灌注; 心肌; HL-1细胞;铁死亡; 长链非编码RNA RMRP; miR-766-5p;
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.12.003
〔摘 要〕 目的 探讨长链非编码RNA RMRP(LncRNA RMRP)通过调控miR-766-5p对氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的小鼠HL-1心肌细胞铁死亡的影响及机制。方法 体外培养HL-1细胞,并构建OGD/R模型,qRT-PCR检测不同再灌注时间点HL-1细胞中LncRNA RMRP表达水平。将LncRNA RMRP小RNA干扰片段(si-RMRP)及其阴性对照(si-NC)、miR-766-5p抑制剂(miR-766-5p inhibitor)及其阴性对照(inhibitor-NC)转染至HL-1细胞中,再进行OGD/R处理。CCK-8检测细胞存活率;试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平及细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和亚铁离子(Fe2+)水平;qRT-PCR检测细胞中LncRNA RMRP和miR-766-5p表达水平;Western blot检测细胞中铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、铁蛋白重链1(FTH1)表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA RMRP与miR-766-5p之间的海绵吸附关系。结果 HL-1细胞中LncRNA RMRP表达水平随着再灌注时间的延长逐渐升高(P2+含量,抑制细胞中SOD和GSH活性(P2+含量,增加细胞中SOD和GSH活性(P