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乙酰唑胺抑制自噬对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡和炎症反应的影响

安徽医科大学学报 2025, 12, v.60 2187-2196     字体:

基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:81972040);安徽省高校协同创新项目(编号:GXXT-2022-063)~~

作者:王梦晴;张曼玉;顾胜龙;黄艳;李荣;

关键词:乙酰唑胺; 类风湿关节炎; 成纤维样滑膜细胞; 细胞增殖; 细胞凋亡;自噬;

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.12.001

〔摘 要〕 目的 研究水通道蛋白1(AQP1)抑制剂乙酰唑胺(AZ)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖、凋亡和炎症反应的影响及其潜在机制。方法 使用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的RA-FLS作为体外RA模型。采用MTT法、IF染色及EdU掺入实验研究AZ对RA-FLS增殖的影响。通过Hoechst染色、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术及线粒体膜电位实验检测细胞凋亡情况。使用ELISA和实时定量PCR法检测促炎因子的水平。通过IF染色及mCherry-GFP-LC3B斑点实验评估细胞自噬水平。Western blot检测与自噬、凋亡及增殖相关的蛋白表达。通过联合使用自噬激活剂雷帕霉素(RAPA)或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),探讨抑制自噬在AZ治疗RA-FLS中的作用。结果 AZ剂量依赖性地抑制RA-FLS增殖,促进其凋亡,并减少促炎细胞因子的产生。AZ抑制RA-FLS中的保护性细胞自噬,表现为LC3B水平降低(P