基金项目: 国家自然科学基金(编号:81702540)
作者:郭亮;肖峻;陶陶;
关键词:前列腺癌;;miR-143;;增殖;;凋亡
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.05.003
〔摘 要〕 目的 分析miR-143对前列腺癌细胞PC3增殖和凋亡的影响。方法实验分为未转染的PC3细胞(PC3组)、转染miR-NC的对照组细胞(PC3/miR-NC组)和稳定表达miR-143的PC3细胞(PC3/miR-143组),通过免疫荧光和Real-time PCR进行鉴定。利用CCK-8法和流式细胞术分别分析miR-143表达水平变化是否影响PC3细胞的增殖和凋亡。再使用在线分析软件预测miR-143的靶基因,随后构建荧光素酶报告基因质粒,通过荧光素酶报告基因法分析miR-143与靶基因的靶向结合位点。结果在PC3/miR-143组中miR-143的表达水平高于PC3组(P<0.01)和PC3/miR-NC组(P<0.01)。CCK-8检测结果显示PC3/miR-143组细胞的增殖能力与PC3组(P<0.05)和PC3/miR-NC组相比下降(P<0.01)。流式细胞术检测的结果显示,PC3/miR-143组细胞的凋亡水平与PC3组和PC3/miR-NC组细胞比较增加(P<0.01)。在线分析软件预测miR-143能够靶向结合三叶因子3(TFF3)的3′-UTR;双荧光素酶报告基因的结果进一步证实miR-143能够靶向作用于TFF3的3′-UTR,Real-time PCR的结果表明在过表达miR-143能够抑制PC3细胞中TFF3的表达。在稳定表达miR-143的PC3细胞中转染TFF3真核表达质粒能够抵消miR-143的作用。结论miR-143通过靶向作用于TFF3的3′-UTR,抑制其表达,抑制PC3细胞的增殖。