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长链非编码RNA AC005062.1通过调控结肠癌转移相关基因1的表达对结直肠癌恶性表型的影响

安徽医科大学学报 2022 05 v.57 736-741     字体:

基金项目: 安徽高校自然科学研究重点项目(编号:KJ2019A0380);;蚌埠市科技创新指导类项目(编号:20200341)

作者:李志祥;谢强;王彬彬;喻大军;钱军;

关键词:结直肠癌;;lncRNA AC005062.1;;MACC1;;恶性表型

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.05.012

〔摘 要〕 目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)AC005062.1通过调控结肠癌转移相关基因1(MACC1)的表达对结直肠癌(CRC)恶性表型的影响。方法 应用GSE84983和GSE104364数据库,分析lncRNA AC005062.1在结直肠癌中的表达水平。收集医院肿瘤外科进行CRC手术治疗患者的肿瘤组织(肿瘤组)及癌旁组织(对照组),随机抽取8对,采用qPCR法检测两组中lncRNA AC005062.1的表达。运用小干扰RNA(siRNA)下调CRC细胞中lncRNA AC005062.1的表达后,采用CCK-8法检测两组细胞增殖,流式细胞方法检测两组细胞周期和凋亡,伤口划痕实验检测两组细胞迁移。利用数据库比较lncRNA AC005062.1和MACC1基因在染色上的定位,用qPCR和蛋白免疫印迹方法检测两组组织中MACC1转录水平和蛋白水平的表达;下调CRC细胞中lncRNA AC005062.1,qPCR和蛋白免疫印迹方法检测MACC1转录水平和蛋白水平的表达。结果 GSE84983和GSE104364数据库分析及两组组织检测结果提示CRC中lncRNA AC005062.1呈高表达。下调lncRNA AC005062.1后,CCK-8实验结果显示,下调组HT29细胞增殖速度降低;流式细胞实验表明,下调组HT29细胞的凋亡数量增加、G_1期比例增加,S期和G_2期比例减少;Western blot实验显示下调组HT29细胞内cleaved-caspase-3和Bax表达升高,而Bcl-2表达降低;伤口划痕实验表明,下调组HT29细胞迁移率低于对照组。通过University of California Santa Cruz (UCSC)数据库分析比较显示两者在染色体上的定位很近,MACC1极可能是lncRNA AC005062.1的靶基因;检测结直肠癌两组组织中MACC1 mRNA水平,结果显示MACC1在CRC中高表达,且下调lncRNA AC005062.1在HT29细胞中的表达,可使MACC1表达降低。结论 lncRNA AC005062.1可通过调控MACC1在CRC中表达,抑制结直肠癌细胞HT29增殖、周期及迁移,促进其凋亡。