基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:82060540);广西自然科学基金项目(编号:2025GXNSFHA069028);
作者:赵云;马贝贝;幸化学;黄绍峰;张忠伟;凌博
关键词:ZEB1;肺腺癌;转移;增殖;侵袭;细胞周期;
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2026.03.012
〔摘 要〕 目的 探讨锌指E盒结合同源盒1(ZEB1)对肺腺癌H322细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法 基于GEO和TCGA公共数据库分析转录因子ZEB1在肺腺癌中的基因表达特征;采用RT-qPCR和Western blot检测肺腺癌细胞系(H322 、A549、95-D)和正常肺上皮细胞(BEAS-2B)中ZEB1的mRNA和蛋白表达水平;进一步构建慢病毒稳定转染ZEB1过表达(OeZEB1)和过表达对照(Oe-NC)H322细胞株;利用CCK-8、平板克隆、EdU、Hoechst33258/PI双染检测细胞的增殖和凋亡水平;划痕实验和Transwell检测细胞的迁移和侵袭能力;流式细胞术分析细胞的周期水平;Western blot检测相关通路的蛋白表达。结果GEO和TCGA结果显示,ZEB1在肺腺癌中的表达特征与肿瘤恶性程度差异有统计学意义;RT-qPCR和Western blot结果显示,ZEB1在肺腺癌细胞系中的表达均高于BEAS-2B(P<0.05);CCK-8、平板克隆、EdU、划痕和Transwell结果显示,与未转染的空白对照(Control)组相比,Oe-ZEB1肺腺癌H322细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强(P<0.05);Hoechst33258/PI双染和流式细胞术结果显示,与Control组相比,Oe-ZEB1肺腺癌H322细胞凋亡水平降低(P<0.05),且Oe-ZEB1肺腺癌H322细胞的G1期比例减少,S期比例增加,从而细胞周期加快;Western blot结果显示,与Control组相比,Oe-ZEB1肺腺癌H322细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)、突变型p53(mutp53)蛋白和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)(P<0.05)表达水平升高;与Control组相比,Oe-ZEB1肺腺癌H322细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、鼠双微粒体2(MDM2)蛋白和p21(P<0.05)表达水平降低。结论 过表达ZEB1可以促进肺腺癌H322细胞的增殖、迁移和侵袭,并可能通过调控MDM2/mutp53/p21通路促使细胞从G0/G1进入S期,从而加快H322细胞周期进程。