〔摘　要〕 目的 优化小鼠Lewis肺癌（LLC）皮下肿瘤组织中髓源性抑制细胞（MDSC）的流式分选流程，提升单细胞制备效率和分选纯度，为后续功能研究提供高质量细胞来源。方法 取C57BL/6小鼠皮下LLC肿瘤组织，首先比较2种酶学消化体系对单细胞制备效果的影响。经死活染料（Live/Dead）及抗小鼠CD45、CD11b、Gr-1抗体标记后，上样至BeckmanCytoFLEX流式细胞分选仪。其次采用常规与优化两种设门策略，优化策略以CD45⁺细胞群为起始门直接圈定MDSC富集区域，后续筛选CD11b⁺Gr-1⁺细胞。最后通过流式细胞术检测纯度，台盼蓝染色检测活率，并以RT-qPCR分析MDSC特征基因Arg1、Nos2、IL-10、S100A8/A9的表达。结果 优化的消化体系显著提高单细胞数量及活率。优化圈门策略后，分选阳性率显著提升。Arg1、Nos2、IL-10及S100A8/A9基因在分选细胞中高表达，提示分选后细胞保持MDSC特征性功能。结论 该研究通过优化“组织消化体系和流式设门策略”，建立了高效分离肿瘤组织MDSC的流程。在保证抗原结构完整的同时提高了单细胞制备得率与纯度，为后续MDSC功能与代谢研究提供可靠的方法学基础。