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miR-513a-3p在结肠癌中高表达并诱导细胞生长和迁移的机制研究

安徽医科大学学报 2021 07 v.56 1088-1093     字体:

基金项目: 江西省卫生计生委科技计划项目(编号:20195362)

作者:缪作华;刘素云;李丹;

关键词:miR-513a-3p;;结肠癌;;细胞迁移;;NF-κB和Wnt/β-catenin信号通路

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.07.016

〔摘 要〕 目的 观察miR-513a-3p在结肠癌组织与癌旁正常组织的表达差异,探讨miR-513a-3p诱导结肠癌(CRC)细胞生长和迁移的机制。方法 收集CRC患者30例作为研究对象,原位杂交和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测CRC组织与癌旁组织miR-513a-3p的表达水平。取人CRC细胞株HT-29和SW480培养后,转染miR-513a-3p类似物作为促进表达组,设置阴性对照组,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验两组细胞活力,Transwell法检测细胞侵袭情况,细胞划痕实验检验细胞迁移能力,Western blot法检测NF-κB和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平。结果 原位杂交检测结果显示,CRC组织miR-513a-3p阳性表达高于癌旁组织。qRT-PCR检测结果显示,CRC组织和癌旁组织miR-513a-3p相对表达量分别为(0.37±0.09)和(1.01±0.16),差异有统计学意义(P<0.01)。与阴性对照组比较,促进表达组细胞活力在3、4 d中均升高(P<0.01),促进表达组的HT-29和SW480细胞侵袭细胞比例升高(P<0.01),促进表达组HT-29和SW480的细胞迁移能力增强。Western blot结果显示,与阴性对照组比较,促进表达组的HT-29细胞和SW480细胞p-p65、p-IκBα、Wnt3a、Wnt5a和β-catenin蛋白相对表达量均升高(P<0.01)。结论 CRC组织miR-513a-3p表达异常升高,过表达的miR-513a-3p促进CRC细胞生长、迁移和侵袭作用,其作用机制可能与NF-κB通路和Wnt/β-catenin通路激活有关。