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敲除hsa_circRNA_102958调节胰腺癌PANC-1细胞增殖、氧化应激和线粒体功能

安徽医科大学学报 2021 07 v.56 1111-1116     字体:

基金项目: 吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(编号:吉教科合字[2015]第406号)

作者:杜敏娟;李立丰;刘瑞琦;宁丽娜;韩楠楠;徐晓光;

关键词:circRNA_102958;;PANC-1;;氧化应激

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.07.020

〔摘 要〕 目的探讨敲除hsa_circRNA_102958对胰腺癌PANC-1细胞增殖、氧化应激和线粒体功能的影响。方法胰腺癌PANC-1细胞转染shRNA-NC和3种不同的circ_102958shRNA序列,RT-PCR检测circRNA_102958表达,选取干扰效果最好的circ_102958 shRNA1进行后续实验,CCK8检测细胞增殖倍数; Hoechst染色观察细胞形态变化;总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒和DCFH-DA试剂盒分别测定SOD、MDA、活性氧(ROS)含量;流式检测JC-1红/绿荧光比值; Western blot检测Bax/Bcl-2、cleaved cas9/cas9、cleaved cas3/cas3、c-Myc蛋白表达。结果 与Control组相比,干扰circRNA_102958表达抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖能力(P<0.05),细胞形态趋于紊乱,凋亡细胞增多,MDA和ROS含量上调(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),JC-1红/绿荧光比值下调(P<0.05),Bax/Bcl-2、cleaved cas9/cas9和cleaved cas3/cas3蛋白表达增高(P<0.05)。结论干扰circRNA_102958表达抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖能力和线粒体功能,促进细胞凋亡和氧化应激水平。