基金项目: 安徽省公益性技术应用研究联动计划项目(编号：1704f0804027);;安徽省教育厅2017年度高校学科拔尖人才学术资助项目(编号：gxbjZD07);;2020年安徽省重点研究与开发计划项目(编号：202004j07020028)
作者：王先鹤;吴慢;邓芳;高慧;
关键词：血管紧张素Ⅱ;;足细胞;;磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B;;瞬时受体电位阳离子通道蛋白6
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.06.009
〔摘 要〕 目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路与瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球足细胞损伤过程中的作用及其可能机制。方法体外培养小鼠肾小球足细胞，分别利用AngⅡ、氯沙坦、PI3K/AKT通路抑制剂(LY294002)、TRPC6通道阻滞剂(SKF96365)进行处理，将细胞分为空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+氯沙坦组、氯沙坦组、AngⅡ+LY294002组、LY294002组、AngⅡ+SKF96365组、SKF96365组，采用qRT-PCR检测各分组细胞TRPC6 mRNA的变化。采用Western blot检测各分组细胞AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、TRPC6蛋白质表达的变化。采用Hoechst 33258染色法检测各组足细胞凋亡情况。结果与空白对照组相比，AngⅡ组AKT磷酸化水平降低，TRPC6的表达升高，足细胞凋亡增加(P<0.05)。与AngⅡ组相比：AngⅡ+SKF96365组AKT磷酸化水平升高，TRPC6的表达下降，足细胞凋亡减少(P<0.05);AngⅡ+LY294002组AKT磷酸化水平减少，足细胞凋亡增加(P<0.05);AngⅡ+氯沙坦组AKT磷酸化水平升高，TRPC6的表达下降，足细胞凋亡减少(P<0.05)。结论AngⅡ可能通过激活TRPC6通道进而抑制PI3K/AKT通路的激活而导致足细胞损伤。