基金项目: 山东省科技发展计划项目(编号:2016ZRC10136)
作者:韩成美;柳梅;任维鑫;朱英斌;陈茂丽;
关键词:HCC;;miR-485-5p;;增殖;;侵袭;;迁移;;Akt/GSK3β
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.05.008
〔摘 要〕 目的研究微小RNA(miR)-485-5p靶向性别决定区Y框蛋白5(SOX5)对肝细胞肝癌(HCC)细胞活力和迁移侵袭能力的影响及作用机制。方法采用Targetscan 7.1预测软件及双荧光素酶报告基因试验检测miR-485-5p对SOX5基因的靶向调控作用。qRT-PCR检测HCC组织中miR-485-5p和SOX5 mRNA的表达水平,并分析两者的相关性。常规培养HCC细胞Huh7,将其分为NC、miR-485-5p mimic和miR-485-5p mimic+oe-SOX5组,采用lip2000进行各组质粒的转染。CCK-8实验检测各组细胞的活力,Transwell实验检测各组细胞的迁移侵袭能力。Western blot检测各组细胞中pAkt和pGSK3β蛋白的表达。结果 Targetscan 7.1预测软件、双荧光素酶报告基因试验表明miR-485-5p靶向调控SOX5。与HCC癌旁组织相比,miR-485-5p在HCC组织中低表达,SOX5 mRNA在HCC组织中高表达,两者的表达呈负相关性。与NC组相比,miR-485-5p mimic组和miR-485-5p mimic+oe-SOX5组HCC细胞活力和迁移侵袭能力降低。而与miR-485-5p mimic组相比,miR-485-5p mimic+oe-SOX5组HCC细胞活力和迁移侵袭能力增加,过表达SOX5减弱了miR-485-5p mimic对HCC细胞活力和迁移侵袭能力的抑制作用。与NC组相比,miR-485-5p mimic和miR-485-5p mimic+oe-SOX5组细胞中pAkt和pGSK3β蛋白表达降低。而与miR-485-5p mimic组相比,miR-485-5p mimic+oe-SOX5组pAkt和pGSK3β蛋白表达增加,过表达SOX5减弱了miR-485-5p mimic对Akt/GSK3β信号通路活性的抑制作用。结论 miR-485-5p靶向调控SOX5表达抑制HCC细胞活力及迁移侵袭能力。