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法舒地尔修饰的巨噬细胞治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的分子机制

安徽医科大学学报 2021 01 v.56 60-64     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81501032);;2019年山西省应用基础研究计划项目(编号:201901D111307)

作者:刘金泉;张继红;刘春云;

关键词:法舒地尔;;实验性变态反应性脑脊髓炎;;M1型巨噬细胞;;M2型巨噬细胞

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.01.012

〔摘 要〕 目的探讨法舒地尔修饰的巨噬细胞治疗实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的分子机制。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)诱导C57BL/6小鼠建立主动免疫EAE模型,免疫9 d后制备腹腔巨噬细胞,用PBS或法舒地尔处理72 h(对照组和实验组)。将对照组和实验组巨噬细胞经尾静脉回输至EAE模型小鼠中,每只5×107个细胞。治疗10 d后分析对照组和实验组小鼠临床行为和体质量变化;经腹腔分离2组小鼠巨噬细胞,采用流式细胞术分析2组M1和M2型巨噬细胞比例;采用荧光定量PCR分析M1和M2巨噬细胞标志物的表达情况;采用ELISA分析白细胞介素(IL)-10和IL-12的水平。结果实验组小鼠临床症状评分较对照组下调,差异有统计学意义(F=6.135,P<0.001)。与对照组比较,实验组小鼠体质量下降较少,差异有统计学意义(F=3.105,P=0.011)。与对照组细胞比较,实验组细胞M2型标志物精氨酸酶(Arg-1)、YM-1和FIZZ mRNA与IL-10细胞因子水平升高,M1型标志物一氧化氮合酶(iNOS)mRNA和IL-12细胞因子水平下降,差异均有统计学意义(t=7.091,P<0.001;t=11.094,P<0.001;t=6.182,P<0.001;t=3.942,P<0.001;t=4.132,P<0.001;t=3.198,P<0.001)。与对照组相比较,实验组的F4/80+CD206+巨噬细胞比例增加,而F4/80+CD16/32+巨噬细胞比例下调,差异有统计学意义(t=10.618,P<0.001;t=12.105,P<0.001)。结论法舒地尔修饰的巨噬细胞可改善EAE小鼠的临床症状,主要是通过改善机体巨噬细胞极性实现的。