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人红白血病斑马鱼异种模型的建立

安徽医科大学学报 2021 01 v.56 77-82     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81760025);;贵州省教育厅青年科技人才成长项目(编号:黔教合KY字[2018]192号);;中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费2018年项目(编号:2018PT31048)

作者:王一慧;刘庆;杨小燕;王念雪;王猛;舒莉萍;何志旭;吴西军;

关键词:斑马鱼;;急性红白血病;;异种移植;;人红白血病细胞;;阿糖胞苷

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.01.015

〔摘 要〕 目的利用斑马鱼胚胎建立人红白血病(HEL)细胞异种移植瘤模型,提供研究血液肿瘤的体内行为和实用药物测试的模型。方法将HEL细胞分为空白组和CM-DiI组,CM-DiI组用活细胞示踪剂进行标记;取野生型斑马鱼培育繁殖,产胚后将胚胎置于28℃孵育48 h至破膜,将破膜后斑马鱼分为空白对照组、PBS实验组、HEL实验组,将CM-DiI组细胞,通过显微注射方式移植到HEL实验组斑马鱼卵黄囊中,PBS实验组注射PBS,再将三组斑马鱼置于34℃温箱培养,通过体内外增殖实验及体内荧光观察等鉴定模型是否建立成功;将鉴定成功的斑马鱼进行阿糖胞苷药物暴露,分为50、100、200 nmol/L组及模型对照组,观察各组浓度药物暴露后异种移植瘤模型中白血病细胞的增殖及迁移情况。结果CM-Dil组与空白组HEL细胞增殖状态相近,差异无统计学意义(P>0.05);通过体内外增殖实验证实了HEL细胞在斑马鱼体内出现了增殖,而HEL实验组斑马鱼存活量相对于空白对照组和PBS实验组降低(P<0.05);三个浓度的阿糖胞苷药物暴露组相对于模型对照组细胞增殖降低(P<0.05)。结论人急性红白血病HEL细胞移植入斑马鱼胚胎后可进行增殖,且增殖活动可被阿糖胞苷干预,证实异种移植瘤模型建立成功。