基金项目: 安徽省公益性技术应用研究联动计划项目(编号:1604f0804011)
作者:任超;葛勇胜;荚卫东;石旭;陈新;刘松;
关键词:原纤维蛋白2;;肝细胞癌;;基质金属蛋白酶;;血管内皮生长因子
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.01.021
〔摘 要〕 目的 探讨原纤维蛋白2(Fibulin-2)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达情况,并探究Fibulin-2对HepG2肝癌细胞的生物学变化以及对细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法 对20例HCC癌组织和癌旁组织中Fibulin-2的表达水平采用Western blot和qRT-PCR检测分析。在细胞实验中,将肝癌细胞分为7组:未经处理的Normal组,进行Fibulin-2沉默处理的Si1、Si2、Si3组及其阴性对照组(Si-NC组),进行Fibulin-2过表达处理的overexpresion-Fibulin2组及其阴性对照组(overexpresion-NC组)。使用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法、细胞划痕实验、Transwell法以及流式细胞术分别检测细胞增殖、迁移、侵袭能力、凋亡率;并使用Western blot检测Fibulin-2过表达或沉默后对应的MMP-2、MMP-9及VEGF的表达情况。结果 qRT-PCR及Western blot实验结果显示,在翻译和转录水平,Fibulin-2在肝癌癌组织中的表达低于相对应的癌旁组织(P<0.05);Fibulin-2沉默组较普通肝癌组细胞中MMP-2、MMP-9及VEGF的表达水平出现相应的增高(P<0.05),肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖能力增强以及细胞凋亡率减少(P<0.05);Fibulin-2过表达组较普通肝癌组细胞中MMP-2、MMP-9及VEGF的表达水平出现相应的降低(P<0.05),肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖能力受抑制以及细胞凋亡增加(P<0.05)。结论 Fibulin-2在肝癌组织中的表达低于癌旁组织,过表达Fibulin-2可抑制肝癌细胞的恶性特征,沉默Fibulin-2则增强肝癌细胞进程。Fibulin-2可能通过调节MMP-2、MMP-9及VEGF的表达水平从而影响肝癌细胞的生物学特征。