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前列腺干细胞抗原及其单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的表达与检测

安徽医科大学学报 2020 12 v.55 1968-1971     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:31660258);;贵州省科学技术基金(编号:黔科合支撑[2019]2787号、黔科合基础[2018]1412、黔科合平台人才[2016]5676);;国家级大学生创新创业训练项目(编号:201810660020)

作者:尚国富;刘江丽;于欢;唐开义;曾柱;胡祖权;王赟;

关键词:前列腺干细胞抗原;;单链抗体;;碱性磷酸酶;;原核表达;;免疫学检测

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.12.030

〔摘 要〕 扩增前列腺干细胞抗原(PSCA)及其特异单链抗体PaFv的编码基因,分别克隆到pET-32a和pDAP2/S载体中,转化大肠杆菌感受态细胞。融合蛋白TrxA-PSCA和PaFv-AP诱导表达后,SDS-PAGE和Western blot分析其表达情况,碱性磷酸酶(AP)显色反应和ELISA检测蛋白的活性。结果显示构建的原核表达体系成功实现TrxA-PSCA和PaFv-AP融合蛋白的可溶性表达,而且PaFv-AP具有与PSCA抗原结合的抗体活性以及AP活性。