基金项目: 国家自然科学基金(编号:81903261)
作者:朱芳芸;张霞婧;冯燕;翟茜;邵勇平;王强;
关键词:电针预处理;;脑缺血再灌注损伤;;谷氨酸转运体2;;谷氨酸;;小鼠
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.11.008
〔摘 要〕 目的探索谷氨酸转运体2(EAAT2)在电针预处理减轻小鼠脑缺血中的作用。方法32只雄性C57BL/6小鼠,随机法分4组(n=8):全脑缺血再灌注(BCCAO)组、电针预处理(EA)+BCCAO组、EAAT2抑制剂二氢卡因酸盐(DHK)+EA+BCCAO组、EAAT2激动剂头孢曲松钠(CXT)+BCCAO组。BCCAO组仅结扎双侧颈总动脉,DHK+EA+BCCAO组和EA+BCCAO组行电针预处理,30 min/次,1次/d,连续5 d,其中DHK+EA+BCCAO组缺血前1 h侧脑室注射DHK 200μg/kg。CXT+BCCAO组腹腔注射头孢曲松钠600 mg/kg,1次/d,连续5 d。预处理后24 h全脑缺血20 min,神经行为学评分和HE染色计算海马CA1区凋亡神经元。Western blot法检测EAAT2蛋白表达,免疫荧光双标染色检测EAAT2和星形胶质细胞活化标志物(GFAP)。结果与BCCAO组比较,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组行为学评分升高,凋亡神经元数目减少(P<0.05);DHK+EA+BCCAO组与EA+BCCAO组比较,神经行为学评分降低,凋亡神经元数目增多(P<0.05)。Western blot结果:与BCCAO组比较,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组EAAT2蛋白表达水平升高(P<0.05);DHK+EA+BCCAO组与EA+BCCAO组比较,EAAT2蛋白表达水平下降(P<0.05)。免疫荧光双标染色:与BCCAO组比较,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组EAAT2和GFAP蛋白表达增加(P<0.05);DHK+EA+BCCAO组与EA+BCCAO组比较,EAAT2和GFAP蛋白表达降低(P<0.05)。结论电针预处理通过调节星形胶质细胞膜上EAAT2产生脑缺血耐受作用。