基金项目: 国家自然科学基金(编号:81860029);;内蒙古自然科学基金(编号:2016MS0801);;内蒙古自治区卫生和计划生育委员会科研计划项目(编号:201701090);;内蒙古自治区研究生科研创新资助项目(编号:S2018112036Z);;包头医学院“花蕾计划”项目(编号:2018BYJJ-HL-05、2018BYJJ-HL-25)
作者:李旭妍;孙明玥;苏燕;杨丽丽;王亚奇;宋芳;闫巧梅;黄世琪;闫朝丽;萨如拉;李晶晶;梁浩;王云霞;韩家鑫;聂欣雨;刘瑞刚;
关键词:红细胞;;葡萄糖;;能量代谢;;衰亡
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.11.011
〔摘 要〕 目的 探讨体外不同浓度葡萄糖对红细胞能量代谢的影响及其分子机制。方法 采集6例健康成人新鲜抗凝血,离心去除白细胞和血浆,用PBS重悬洗涤红细胞3次后,将6组红细胞轻轻混匀后再分为4组,分别向其中加入D-葡萄糖溶液,使其终浓度分别为0、6、20、30 mmol/L,于37℃培养0、24、48 h后,取部分红细胞悬液利用流式细胞仪及多功能酶标仪检测红细胞内ATP含量、己糖激酶(HK)活性、丙酮酸激酶(PK)活性、活性氧(ROS)含量及红细胞衰亡率。实验结果采用单因素方差分析进行组间变量比较。结果与对应时间点的0 mmol/L组比较,用浓度为6、20、30 mmol/L的葡萄糖孵育红细胞24和48 h后,红细胞内HK活性、PK活性、ATP含量均增加,且随着葡萄糖浓度增加呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05);而ROS含量和红细胞衰亡率是降低的,且随葡萄糖浓度增加而降低,差异有统计学意义(P<0.05)。用不同浓度葡萄糖(浓度分别为0、6、20、30mmol/L)培养红细胞48 h后,各不同浓度组红细胞内ROS含量和红细胞衰亡率随着孵育时间延长而增加,与对应浓度组的0 h比较,差异有统计学意义(P<0.05); HK活性和PK活性逐渐降低,与对应浓度组的0 h比较,差异有统计学意义(P<0.05)。而ATP含量呈波动式下降,与对应浓度组的0 h比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 红细胞体外短期高糖培养,不仅会加强红细胞内能量代谢,而且会降低氧化应激及衰亡发生率,而没有葡萄糖供应会导致红细胞内ATP不断被消耗,氧化应激增强,衰亡增多。