〔摘　要〕 目的 探讨建立阿米卡星（AKN）体外肾损伤模型的方法，研究在AKN体外肾损伤模型中王不留行黄酮苷（VA）的保护作用及机制。方法 体外培养人肾小管上皮细胞（HK-2），孵育不同浓度的AKN或VA,MTT法检测细胞活力，确定药物浓度；采用二氢乙锭（DHE）探针和谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）检测试剂盒检测细胞内氧化应激状态的变化；提取总RNA，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾损伤分子-1(KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）基因表达的变化；提取总蛋白，Westernblot检测铁死亡相关的蛋白溶质载体蛋白家族47成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的水平。结果 高浓度AKN在体外可以显著引起HK-2细胞活力的下降，AKN对HK-2细胞的半数抑制浓度（IC50）为（5.74±0.47）mmol/L。25～100μmol/L的VA可以提高AKN刺激后的HK-2细胞活力（P<0.05）。AKN(4mmol/L)处理后，KIM-1和NGAL的mRNA表达水平显著高于阴性对照（NC）组（P<0.001）;VA(50μmol/L)可以显著降低KIM-1(P<0.01)和NGAL(P<0.05)的mRNA表达水平。AKN处理3h后DHE染色强度升高但差异无统计学意义，6～24h后DHE染色强度显著大于0h组（P<0.01）。此外，AKN处理6～24h后MDA水平显著上升，GSH水平显著下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。AKN刺激6～24h后，铁死亡相关蛋白SLC7A11和GPX4表达均明显下降（P<0.001）。VA同时孵育24h，显著逆转DHE染色、GSH和MDA水平的变化及SLC7A11和GPX4蛋白的下降（P<0.001）。结论 该研究通过高浓度AKN体外刺激HK-2细胞建立AKN体外肾损伤模型，并发现VA可能通过抑制过氧化应激相关的铁死亡途径减轻AKN导致的肾小管细胞损伤。