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PHF5A通过NF-κB通路影响胃癌细胞MGC803的增殖和迁移

安徽医科大学学报 2020 08 v.55 1198-1203     字体:

基金项目: 安徽省科技计划项目(编号:1604a0802075)

作者:曹一凡;张如通;苟雅雯;陈乐乐;陈思;张开光;

关键词:胃癌;;PHF5A;;NF-κB信号通路;;MGC803

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.08.010

〔摘 要〕 目的观察PHD锌指结构域蛋白5A(PHF5A)基因在胃癌细胞和胃正常细胞中的表达情况,阐明敲低PHF5A基因可能通过影响NF-κB通路抑制胃癌细胞的增殖、克隆形成和迁移。方法使用Western blot和qPCR法检测PHF5A在胃正常上皮细胞GES-1和胃癌细胞系MGC803、MKN45、AGS中的表达情况。设置转染PLKO.1空载质粒的MGC803细胞为阴性对照,转染PLKO.1-ShPHF5A-Sh1和PLKO.1-ShPHF5A-Sh2质粒的作为实验组,使用两组不同序列在MGC803中抑制PHF5A的表达。采用克隆形成、细胞增殖计数检测细胞增殖情况,采用划痕实验检测细胞体外迁移能力变化。用Western blot检测阴性对照组和实验组中NF-κB P65(核内)、p-IkBα,IkBα,Cyclin D1蛋白表达情况。结果 Western blot和qPCR结果显示胃癌细胞系MGC803、AGS、MKN45中PHF5A的表达量高于胃正常细胞系GES-1,差异有统计学意义。在MGC803细胞中抑制PHF5A的表达后,PHF5A蛋白的表达水平降低。与对照组比较,细胞的增殖和迁移都受到了抑制。同时,实验组细胞NF-κB P65核内表达降低,IκBα磷酸化水平下降,Cyclin D1表达水平下降(P<0.05)。结论 PHF5A在胃癌肿瘤细胞中的表达显示高于正常细胞,可能通过NF-κB信号通路来影响胃癌细胞MGC803的增殖和迁移。