安徽医科大学学报
2020 07 v.55 1008-1013
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基金项目: “十三五”国家科技重大专项(编号:2018ZX10711001);;国家自然科学基金(编号:81571963、 81772203)
作者:罗婉蓉;刘伯玉;陈振;任翠平;高越;杨莉;朱禹;余东阳;柳燕;
关键词:斑点热立克次体;;ompA;;TaqMan探针;;实时荧光定量PCR
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.07.005
〔摘 要〕 目的建立斑点热群立克次体(SFGR)TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)快速检测方法。方法根据日本斑点热立克次体外膜蛋白A(ompA)基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检测,用建立的此检测方法和常规的巢式PCR方法同时对临床收集的80份患者血标本进行检测并比较两者结果。结果成功建立了检测SFGR的实时荧光定量PCR方法,标准曲线的循环阈值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(r>0.99),且在检测SFGR核酸样本时具有良好的灵敏度、特异性和重复性。结论该研究建立了基于TaqMan探针检测SFGR的实时荧光定量PCR检测方法,为临床实验室快速确诊SFGR疾病提供了快速、有效的技术手段。