基金项目: 江苏省卫生计生委科研计划项目(编号:BJ16008)
作者:杨熹;丁永斌;宋冬梅;葛军;颜雪方;
关键词:结肠癌;;miR-373-3p;;Rab22a;;增殖;;转移
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.07.004
〔摘 要〕 目的探究miR-373-3p通过靶向Rab蛋白22a(Rab22a)对结肠癌SW480细胞增殖和转移的调节作用。方法 RT-PCR检测结肠癌组织和细胞中miR-373-3p的表达。荧光素酶报告检测miR-373-3p和Rab22a相互作用关系。将SW480细胞分为空白对照组(SW480组)、阴性对照组(mimic NC组)、miR-373-3p mimic组、pLV-Rab22a组、pLV-Rab22a+miR-373-3p组,各组分别转染miR-373-3p或Rab22a重组慢病毒,RT-PCR检测miR-373-3p和Rab22a转录水平,CCK-8法检测细胞增殖水平,划痕愈合法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测Rab22a、Ki67、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)蛋白表达。结果与正常结肠组织比较,结肠癌组织中miR-373-3p表达降低。与人正常结肠细胞NCM460比较,结肠癌细胞株miR-373-3p均降低。在荧光素酶报告实验中,与Rab22a WT+mimic NC比较,Rab22a WT+miR-373-3p mimic荧光素酶活性降低。在细胞实验中,与SW480组比较,miR-373-3p mimic组miR-373-3p表达和E-cadherin蛋白表达升高,Rab22a基因和蛋白表达、细胞增殖水平、迁移和侵袭能力、Ki67、N-cadherin蛋白表达降低,pLV-Rab22a组细胞增殖水平、迁移和侵袭能力、Rab22a、Ki67、N-cadherin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低;与pLV-Rab22a组比较,pLV-Rab22a+miR-373-3p组细胞增殖水平、迁移和侵袭能力、Rab22a、Ki67、N-cadherin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高。结论 miR-373-3p可靶向作用于Rab22a,对结肠癌SW480细胞增殖和转移起抑制作用。