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血小板反应蛋白-1对人牙周膜成纤维细胞表达IL-6及COX-2的影响

安徽医科大学学报 2020 04 v.55 550-556     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1908085MH256);;安徽医科大学博士科研资助基金(编号:XJ201708);;国家级大学生创新创业训练计划项目(编号:201810366041)

作者:刘笑笑;沈振国;赵荣权;邢田;侯爱兵;

关键词:TSP-1;;人牙周膜成纤维细胞;;腺病毒;;重组蛋白;;牙周炎

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.04.013

〔摘 要〕 目的探究血小板反应蛋白(TSP)-1对人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)表达白细胞介素(IL)-6和环氧化酶(COX)-2的影响。方法选取12只6周龄雄性SD大鼠随机均分为正常组和牙周炎组,丝线结扎法建立实验性牙周炎大鼠模型;Western blot检测大鼠牙龈组织中TSP-1的蛋白表达;qRT-PCR检测每组牙龈组织中TSP-1、IL-6、COX-2 mRNA表达。组织块法分离培养hPDLFs,构建携带TSP-1基因的重组腺病毒(Ad-TSP-1-GFP),同时以空载腺病毒(Ad-GFP)作为阴性对照,转染细胞;或在hPDLFs培养上清液中添加重组TSP-1蛋白(rTSP-1)。ELISA检测hPDLFs表达IL-6的蛋白水平;Western blot检测hPDLFs表达COX-2的蛋白水平;qRT-PCR检测IL-6、COX-2 mRNA表达水平。结果与正常组比较,实验性牙周炎大鼠牙龈组织中TSP-1蛋白和mRNA表达升高,且IL-6和COX-2 mRNA表达升高。与Ad-GFP组比较,Ad-TSP-1-GFP转染hPDLFs可明显提高细胞TSP-1蛋白和mRNA水平,同时可促进hPDLFs表达IL-6、COX-2蛋白和mRNA水平。与空白对照组比较,添加rTSP-1也可促进hPDLFs表达IL-6、COX-2蛋白和mRNA水平。结论 TSP-1能够显著上调hPDLFs表达IL-6、COX-2的水平,进而加重牙周炎症症状。