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CGRP对人牙周膜干细胞成骨分化和成血管能力影响的体外研究

安徽医科大学学报 2020 03 v.55 356-362     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81771117);;安徽省科技攻关计划项目(编号:1604a0802082);;2016高校学科(专业)拔尖人才学术资助重点项目(编号:gxbjZD2016028)

作者:王芳;李汉青;何家才;

关键词:降钙素基因相关肽;;人牙周膜干细胞;;成骨分化;;成血管能力;;双重调控作用

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.03.007

〔摘 要〕 目的探究在体外降钙素基因相关肽(CGRP)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)成骨分化和成血管能力的影响。方法 hPDLSCs体外分离培养,采用流式细胞术鉴定。给予不同浓度的CGRP处理,CCK-8法检测CGRP对hPDLSCs增殖的影响。通过RT-PCR和Western blot法检测碱性磷酸酶(ALP)、核心结合因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)和血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA以及蛋白表达。在成骨诱导的第7天和第21天分别进行ALP染色和茜素红染色以及半定量分析。结果从人牙周膜组织中分离培养的细胞经鉴定符合间充质干细胞的特征。与0 mol/L组比较,10~(-8) mol/L组、10~(-9) mol/L组的CGRP促进hPDLSCs的增殖(P<0.05),同时使ALP、RUNX2、OCN、VEGF基因和蛋白的表达升高(P<0.05)。ALP和茜素红染色以及半定量分析结果显示,与0 mol/L组比较,10~(-8) mol/L组、10~(-9) mol/L组的CGRP促进hPDLSCs成骨分化中ALP的表达及钙结节的形成。结论特定浓度的CGRP促进hPDLSCs体外成骨分化和成血管能力。