基金项目: 海南省科技厅自然科学基金(编号:818QN319)
作者:韦雪梅;郭义龙;徐志新;
关键词:HTK液;;间断灌注;;移植心脏;;急性排斥反应;;细胞间黏附分子;;IL-17;;凋亡
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.01.022
〔摘 要〕 目的研究HTK液3种不同灌注方法(单纯低温浸泡、持续灌注与间断2 h灌注)对同种异体兔心保存移植后心肌组织细胞间黏附分子(ICAM)-1和白细胞介素(IL)-17表达的影响,探讨HTK液灌注方式对心脏移植后急性排斥反应的影响机制。方法选择健康2月龄新西兰兔共18对36只,雌雄各半,体质量(2. 15±0. 33) kg,随机分为3组,即单纯低温浸泡组(单纯组) 5对、持续灌注组(持续组) 5对和间断2 h灌注组(间断组) 8对。供体心脏离体后经主动脉根部灌注HTK液停跳保护心脏,4℃保存心脏8 h,根据改良Ono术式完成心脏移植模型,取出供体心脏。制备石蜡切片,光学显微镜下HE染色观察组织和细胞的病理改变,分别采用实时定量RT-PCR和Western blot检测组织ICAM-1和IL-17水平,TUNEL试剂盒检测细胞凋亡率。结果 HE染色发现,3组大部分心肌组织结构完整,伴细胞水肿、黏液样变性或坏死,炎性细胞浸润、脂肪化生及小血管生成。半定量分析发现,间断组细胞水肿、炎性细胞和小血管数目明显少于持续组,单纯组最多(P <0. 05)。定量检测ICAM-1和IL-17 mRNAs和蛋白表达水平发现,间断组显著低于持续组,单纯组最高(P <0. 05)。间断组细胞凋亡率低于持续组,单纯组最高(P <0. 05)。结论 HTK液不同灌注方法对同种异体兔心移植后的急性排斥反应影响不同,间断2 h灌注可明显降低受体心肌ICAM-1和IL-17表达,抑制细胞凋亡效应最明显。