安徽医科大学学报
2020 01 v.55 56-59
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基金项目: 江西省自然科学基金(编号:20171BAB205079);;江西省青年科学基金(编号:20192BAB215051)
作者：晏子友;万鸣宏;杨林;杨芸琪;黄伟;沈金峰;罗富里;皮持衡;
关键词：缺氧;;外泌体;;肾小管上皮细胞;;miRNA
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.01.012
〔摘 要〕 目的观察缺氧环境下肾小管上皮细胞(RTEC)外泌体中自噬相关的微小核糖核酸(miRNA)表达量的变化。方法体外培养RTEC,常氧及缺氧分别处理RTEC,采用ExoQuick-TC提取外泌体,采用透射电镜、蛋白浓度定量鉴定并比较外泌体的特性,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测RTEC外泌体中自噬相关miRNA-30b、miRNA-30c、miRNA-214、miRNA-183、miRNA-200a表达量。结果缺氧状态下肾小管细胞分泌的外泌体外观无明显变化,缺氧48 h外泌体/细胞蛋白比值明显上升,明显高于常氧组,随着缺氧时间延长外泌体自噬相关miRNA表达逐渐上升,缺氧组各时间段自噬相关miRNA-30b、miRNA-30c、miRNA-214、miRNA-183、miRNA-200a含量均高于常氧组,且随着缺氧时间延长含量逐渐上升。结论缺氧可改变肾小管细胞分泌外泌体的生物学功能,表现为自噬相关miRNA表达上调,这可能是慢性肾脏病患者重要脏器出现自噬行为的原因之一。