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高脂饮食诱导CYP4A高表达参与小鼠非酒精性脂肪肝病程研究

安徽医科大学学报 2019 11 v.54 1678-1682     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1808085MH284)

作者:高惠芳;曹雅茹;夏宏光;朱项羽;金涌;

关键词:非酒精性脂肪肝;;CYP4A;;脂质过氧化;;氧化应激

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.11.003

〔摘 要〕 目的探讨细胞色素P4504A(CYP4A)在非酒精性脂肪肝(NAFLD)中的调节作用,并检测其在脂肪肝中的变化。方法高脂乳剂灌胃C57BL/6小鼠方法建立NAFLD动物模型,分对照组和高脂乳剂灌胃组,高脂乳剂灌胃组又分别设4、6、8、10周组。肝组织切片进行HE染色。生化试剂盒检测小鼠血清TG、ALT、AST、MDA、SOD的含量变化;Western blot法检测肝组织CYP4A的变化;液相色谱-串联质谱法(LC/MS/MS)检测花生四烯酸经CYP4A羟基化产物20-羟基二十烷四烯酸(20-HETE)的含量;冰冻切片免疫荧光法检测肝组织活性氧的荧光强度。结果肝组织HE染色显示脂肪空泡于第10周出现。高脂乳剂灌胃C57BL/6小鼠后血清TG、ALT、AST和MDA的含量随高脂乳剂灌胃时间的延长而逐渐升高,而SOD水平显示下降的趋势。肝组织中CYP4A和20-HETE的表达量随着肝脏脂质堆积而增多。肝组织活性氧的荧光强度表现为第10周最强。结论 CYP4A参与NAFLD时的脂质代谢使花生四烯酸代谢产物20-HETE合成增多,同时诱导活性氧的产生导致氧化应激从而促进脂质过氧化。