基金项目: 国家自然科学基金面上项目(编号:81973625);上海市启明星项目(编号:22YF1441400);安徽医科大学研究生科研与实践创新项目资助(编号:YJS20230098);上海市中医医院第三届中医传承人才项目(编号:2023zycc02);
作者:唐东豪;陈进宝;贾琳琳;沈东晓;尚靖;冯月娇;卢佳豪;肖增友;何钰洁;王杰
关键词:蟾毒灵;M2型巨噬细胞;结直肠癌;
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.02.021
〔摘 要〕 目的 探讨蟾毒灵(BU)抑制M2型巨噬细胞介导结直肠癌转移的作用。方法 用佛波酯(PMA)诱导人急性白血病单核细胞(THP-1)分化为M0型巨噬细胞,48h后用含有白细胞介素-4(IL-4)和IL-13的培养基处理M0型巨噬细胞,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、形态学、实时荧光定量(RT-qPCR)实验观察其表面标志物和形态变化,RT-PCR和ELISA实验检测M2型巨噬细胞的表面标志物转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10。通过ELISA实验比较M2型巨噬细胞和结直肠癌细胞HCT116上清液中IL-6分泌水平,通过Transwell实验、划痕实验、RT-qPCR和Western blot实验检测条件培养基对结直肠癌细胞HCT116的的影响。在条件培养基中加入BU后,通过Western blot、Transwell实验、划痕实验、和RT-qPCR实验观察可以HCT116中AKT/PI3K蛋白以及迁移和上皮间质转化能力的变化。结果 将THP-1成功诱导成为M2型巨噬细胞。M2型巨噬细胞通过分泌IL-6激活了HCT116中AKT/PI3K蛋白磷酸化,促进了其迁移和上皮间质转化能力。BU可以抑制M2巨噬细胞介导的HCT116迁移和上皮间质转化。结论 M2型巨噬细胞释放IL-6激活了结直肠癌细胞AKT/PI3K信号通路,促进了其迁移和上皮间质化。此外,BU可以抑制其促迁移和上皮间质化作用。