基金项目: 国家自然科学基金(编号:81874259、81673141、81502791);;安徽高校自然科学研究项目(编号:KJ2017A206)
作者:谢海波;李娜;陈双平;张家祥;王峰;杨玲;朱启星;
关键词:三氯乙烯;;NLRP3;;肝脏
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.05.018
〔摘 要〕 目的检测小鼠肝脏NLRP3水平,探讨NLRP3与三氯乙烯(TCE)致敏小鼠免疫性肝损伤的关系。方法选取22只无特定病原体雌性6~8周BALB/c小鼠,随机分为空白对照组6只,溶剂对照组4只,72 h TCE组12只,建立TCE小鼠致敏模型。于末次激发后24 h依据小鼠背部皮肤致敏反应评分情况,将TCE组小鼠分为TCE致敏组与TCE未致敏组。所有小鼠于末次激发后72 h处死,眼球取血测定小鼠肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST);无菌取小鼠肝脏,石蜡包埋切片后观察小鼠肝脏病理,免疫组织化学(IHC)法及Western blot法测定小鼠肝脏NLRP3蛋白表达情况。实时荧光定量PCR法检测小鼠肝脏NLRP3基因水平。结果 TCE致敏组小鼠血清ALT、AST水平较空白对照组、溶剂对照组和TCE未致敏组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、溶剂对照组、TCE未致敏组小鼠肝细胞未见明显病理改变。TCE致敏组小鼠肝脏可见大量肝细胞肿胀,细胞核破裂或消失,并有炎细胞聚集。免疫组化法结果显示TCE致敏组小鼠肝脏有大量NLRP3表达,空白对照组、溶剂对照组、TCE未致敏组未见明显表达。Western blot结果显示TCE致敏组小鼠肝脏NLRP3蛋白表达较空白对照组、溶剂对照组和TCE未致敏组明显升高(P<0. 05)。实时荧光定量PCR结果显示TCE致敏组小鼠NLRP3基因较其他组明显升高,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 NLRP3在TCE致敏组小鼠肝脏中表达较其他组明显增加,提示NLRP3的表达可能与TCE致敏小鼠免疫性肝脏损伤有关。