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多肽~(301)LARSLKT~(307)对斑马鱼胚胎早期心脏发育的影响

安徽医科大学学报 2019 05 v.54 678-684     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81870240、81470376)

作者:胡银;刘恒;严湘芸;庄斌;陈文娟;王星云;韩树萍;余章斌;

关键词:生物活性多肽;;先天性心脏病;;法洛四联症;;斑马鱼

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.05.003

〔摘 要〕 目的探究踝蛋白-1(TALIN-1)来源的多肽~(301)LARSLKT~(307)对斑马鱼胚胎心脏发育的影响。方法①利用Pubmed、Uniprot和ProtParam tool在线生物信息学分析网站,对多肽~(301)LARSLKT~(307)的保守性、理化特性和其前体蛋白进行分析;②在斑马鱼胚胎1细胞期,镜下显微注射多肽~(301)LARSLKT~(307)后,计数36、48及72 h斑马鱼的心率并观察对斑马鱼心包发育的影响;③利用在心脏房室特异表达的基因探针cmlc2、amhc及vmhc原位杂交技术显色后检测心脏的形态;④利用实时定量PCR(qPCR)检测斑马鱼心脏发育相关基因amhc、vmhc、mef2c和nkx2.5的表达变化。结果①多肽~(301)LARSLKT~(307)是位于其前体蛋白TALIN-1的B41结构域的亲脂性肽;②实验多肽注射组的斑马鱼胚胎的心率在36、48及72 h均出现降低(P<0.05),且心包出现明显水肿;③实验多肽注射组斑马鱼胚胎48 h环化未能完成,对照肽注射组及野生型组环化正常;④qPCR检测显示,实验多肽注射组的斑马鱼心脏发育相关基因amhc、vmhc、mef2c、nkx2.5较野生型组均有不同程度下降。结论多肽~(301)LARSLKT~(307)可影响斑马鱼胚胎期心脏的发育及功能。