基金项目: 国家自然科学基金(编号:81374002)
作者:王良芳;陈志武;
关键词:内皮细胞;;低氧;;硫化氢;;RhoA-ROCK通路
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.01.010
〔摘 要〕 目的观察大鼠脑血管内皮细胞中内皮源性硫化氢(H_2S)、一氧化氮(NO)及Ras同源基因家族成员A-Rho相关的卷曲螺旋激酶(RhoA-ROCK)信号通路在低氧性损伤中的动态变化,并探讨内皮源性H_2S对RhoA-ROCK通路的影响。方法胶原酶消化法原代培养大鼠脑血管内皮细胞,内皮细胞分别低氧培养1、2、4、8、24 h后,测定H_2S和NO含量,G-LISA检测RhoA活性,细胞裂解后对相关蛋白进行免疫印迹分析。结果低氧1 h后H_2S含量显著下降; NO含量在低氧4 h后开始显著下降; RhoA活性低氧8 h后才有显著增加。低氧4 h时内源性H_2S合成酶胱硫醚γ-裂解酶(CSE)表达就有了显著下降;低氧8 h后内皮型一氧化氮合成酶(e NOS)才开始明显降低;低氧8 h时Rho激酶ROCK1、ROCK2表达显著增加。内源性和外源性H_2S均可抑制RhoA的激活。结论在大鼠脑血管内皮细胞低氧损伤过程中,内皮源性H_2S降低发生最早,其次为NO,而RhoA-ROCK通路激活发生在后,可能是继发于H_2S的降低。