安徽医科大学学报
2018 08 v.53 1304-1307
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基金项目: 江西省卫生计生委科技计划(编号:20165361)
作者:张慧娟;张伶;胡蓉;江丽霞;钟田雨;
关键词:白血病细胞;;逆转录病毒载体;;磷酸钙转染法
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.08.029
〔摘 要〕 为了降低实验成本,解决悬浮细胞难转染问题,本研究进行逆转录病毒包装及感染悬浮细胞—白血病细胞的实验。采用磷酸钙转染方法将逆转录病毒质粒MSCV-PIG、Gag-pol与VSVG共转染入293T细胞,通过旋转法将病毒原液与KG-1a白血病细胞共孵育,最后用嘌呤霉素筛选稳定细胞株。逆转录病毒原液感染KG-1a细胞48 h后KG-1a细胞的感染效率约为10%。但嘌呤霉素稳筛后,携带逆转录病毒载体的KG-1a细胞阳性率可达85%以上。通过低成本的磷酸钙转染方法获取病毒,采用病毒原液成功感染较难转染的白血病细胞,为做基础研究的科研人员提供借鉴。