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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌药物敏感性和耐药基因研究

安徽医科大学学报 2018 08 v.53 1231-1235     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81171606)

作者:王健;潘亚萍;徐元宏;沈继录;王中新;

关键词:肺炎克雷伯菌;;碳青霉烯酶;;外排泵;;耐药

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.08.015

〔摘 要〕 目的研究碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌(CRKP)抗生素敏感性和耐药基因分析,以及通过表型检测分析外排泵抑制剂对CRKP的亚胺培南、美罗培南和替加环素耐药性影响。方法收集并筛选医院临床分离非重复的CRKP,采用纸片扩散法和Vitek2法测定临床常见抗菌药物的敏感性;采用Carba-NP试验和改良Hodge试验对碳青霉烯酶进行筛选,并同对碳青霉烯酶耐药基因、ESBL和Amp C酶基因进行PCR扩增和序列分析;采用琼脂稀释法检测筛选菌株外排泵的表型;ERIC-PCR进行同源性分析。结果共筛选出31株CRKP,Carba-NP试验和改良Hodge试验显示有1株细菌不产碳青霉烯酶;KPC酶基因的PCR检测结果显示有27株KPC酶检测阳性,与碳青霉烯酶表型检测基本一致,部分菌株同时还产生了ESBL和Amp C酶;外排泵的抑制试验结果显示有3株对亚胺培南和美罗培南的最低抑菌浓度(MIC)分别下降4倍和8倍,而替加环素却未下降;ERIC-PCR分型显示有9种类型,其中1型13株,为主要流行株。结论 CRKP存在耐药基因积聚共存现象,导致CRKP对大多数临床常用抗菌药物呈高度耐药;CRKP产碳青霉烯酶以KPC-2型酶为主,是CRKP对碳青霉烯类耐药的主要机制;外排泵系统可能参与CRKP对碳青霉烯类耐药。