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microRNA-7对人肝癌细胞MHCC-97H上皮间质转化的影响及作用机制

安徽医科大学学报 2018 01 v.53 29-34     字体:

基金项目: 安徽省自然科学基金(编号:1608085MH198)

作者:张传海;桂阳;郭凤林;马金良;余继海;

关键词:microRNA-7;;MHCC-97细胞;;上皮间质化转变;;EGFR

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.01.007

〔摘 要〕 目的探讨microRNA-7(miR-7)对肝癌细胞株MHCC-97H上皮-间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法将构建的miR-7真核载体单独及分别联合野生型或突变型EGFR 3’-UTR真核载体共转染MHCC-97H细胞,采用Realtime PCR、Western blot检测EMT标识蛋白E-cadherin、β-catenin、N-cadherin和Vimentin的表达;细胞划痕、Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化;双荧光素酶实验分析miR-7对EGFR的调控作用。结果与正常组相比,转染miR-7真核载体组细胞E-cadherin、β-catenin表达均显著升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin表达则明显降低(P<0.01);同时,细胞的侵袭、迁移能力均明显减弱(P<0.01);分别与转染GV272+EGFR 3’-UTR野生型和转染GV272/miR-7+EGFR 3’-UTR突变型相比,转染GV272/miR-7+EGFR 3’-UTR野生型组萤火虫荧光素酶活性显著降低(P<0.01)。结论 miR-7可通过与EGFR 3’-UTR结合而抑制EGFR信号通路,降低MHCC-97H细胞侵袭、迁移能力,进而抑制MHCC-97H细胞EMT。