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双光子显微镜用于在体监测小鼠视交叉上核Ca~(2+)动态变化的方法学研究

安徽医科大学学报 2017 11 v.52 1583-1587     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81571293);;中国科学院脑功能与脑疾病重点实验室开放课题(编号:2013-1)

作者:王聪;马腾飞;张晨;王元银;王烈成;

关键词:双光子;;荧光成像技术;;在体;;钙成像;;视交叉上核

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.11.001

〔摘 要〕 目的通过颅底暴露手术联合双光子荧光成像技术实现在体记录视交叉上核(SCN)神经元钙离子活动信号并研究其活动规律的新型方法。方法对麻醉小鼠实行颅底暴露手术,通过双光子荧光显微镜对已注射钙指示剂的活体小鼠SCN核团钙信号进行实时动态测定。结果成功建立一套小鼠颅底暴露SCN核团手术方法,术后应用双光子显微镜清晰地检测到SCN核团钙离子荧光信号,也能够实现稳定的在体细胞钙离子成像,并发现不同自发反应细胞中钙离子活动规律差异。结论通过颅底暴露手术,利用双光子显微镜成功实现了实时监测SCN区域神经元钙离子信号。