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胃癌组织中NLRC5表达的意义及其影响胃癌侵袭转移的可能机制

安徽医科大学学报 2017 10 v.52 1455-1462     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:81572305);;安徽省自然科学基金(编号:KJ2017A204)

作者:徐徽;吴文涌;张震;孟刚;

关键词:胃癌;;NLRC5;;临床病理特征;;侵袭转移

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.10.009

〔摘 要〕 目的观察核苷酸结合结构域受体家族含CARD结构域-5(NLRC5)、β-catenin在胃癌组织中的表达情况。分析NLRC5与胃癌临床病理特征及预后的关系。并初步探讨NLRC5与Wnt/β-catenin信号通路间的关系。方法收集根治性胃癌切除术患者石蜡标本93例,免疫组化检测胃癌组织中NLRC5和β-catenin的表达情况;分析NLRC5的表达与胃癌临床病理特征的关系。采用胃癌细胞株MKN-45和MGC-803分别转染p EGFP-C2-NLRC5重组质粒,qRT-PCR法和Western blot法验证NLRC5转染效率。采用MTT细胞增殖和细胞划痕实验对NLRC5进行功能分析,观察体外实验中NLRC5表达变化对胃癌细胞的生物学行为的影响,采用Western blot法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的变化。结果 NLRC5在93例胃癌标本中阳性表达67例(72.04%),阴性表达26例(27.96%)。NLCR5的表达情况与胃癌的TNM分期、淋巴结转移和复发情况密切相关。Kaplan-merier生存分析结果显示NLCR5阴性表达的患者预后好于阳性表达患者(P<0.05)。93例胃癌标本中β-catenin阳性表达63例(67.74%),阴性表达30例(32.26%)。Cox多因素回归分析显示,NLRC5和β-catenin的阳性表达、低TNM分期、淋巴结转移是影响胃癌患者预后的独立危险因素。胃癌细胞在过表达NLRC5后,MTT细胞增殖和划痕实验结果显示,细胞的增殖和迁移能力显著增强(P<0.05,P<0.01),Western blot实验结果显示,Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白β-catenin和下游关键靶蛋白C-myc、金属基质蛋白酶-7的表达水平明显提高。结论 NLRC5广泛表达于胃癌组织中,其表达与胃癌的TNM分期和淋巴结转移密切相关。Kaplan-merier生存分析显示:NLRC5高表达是影响胃癌预后的危险因素。Cox多因素回归分析显示:NLRC5高表达是影响胃癌预后的独立危险因素。NLRC5与β-catenin的表达呈正相关性,NLRC5的表达变化影响胃癌细胞的生物学行为和Wnt/β-catenin信号通路的关键蛋白的表达。提示NLRC5可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌的浸润和转移。