基金项目: 国家自然科学基金(编号:31370983);;安徽省杰出青年基金(编号:1508085J08);;安徽省自然科学基金(编号:1408085 MKL29);;安徽高校省级自然科学研究项目(编号:KJ2013Z204);;安徽省科技攻关计划项目(编号:1401045013、1604a0802082);;高校优秀青年人才支持计划重点项目(编号:gxyq ZD2016058)
作者：王颖;张雷;周咏;张凯;王元银;何家才;邹多宏;
关键词：miR-21;;骨髓间充质干细胞;;慢病毒转染;;成骨分化
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.09.014
〔摘 要〕 目的体外研究检测miR-21诱导拉布拉多犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用。方法构建LentimiR-21-Luciferase与Lenti-Lac Z-Luciferase慢病毒载体,分别转染犬BMSCs,将研究分为miR-21组与Lac Z组。利用体外细胞划痕实验来比较转染后BMSCs的爬行迁移能力。在转染后的第0、1、4、7、14天分别提取miR-21组与Lac Z组BMSCs的mRNAs和蛋白。通过Real time-PCR技术和Western blot检测成骨分化关键因子骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)的表达。结果Lenti-miR-21-Luciferase与LentiLac Z-Luciferase慢病毒载体成功转入BMSCs后,miR-21组的BMSCs细胞爬行迁移能力显著增强(P<0.001);Real timePCR和Western blot结果显示,miR-21可以显著上调BMSCs成骨分化关键因子OCN和OPN的表达(P<0.05)。结论miR-21可以显著促进BMSCs的成骨分化,为进一步的体内实验奠定基础。