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CSE过表达保护低氧/无血清诱导骨髓间充质干细胞凋亡的机制

安徽医科大学学报 2017 01 v.52 37-41     字体:

基金项目: 安徽高校自然科学研究项目(编号:kj2015Z024);;北京协和医学基金-睿E(睿意)急诊医学研究专项基金(编号:R2015012);;安徽医科大学校基金(编号:2015xkj062)

作者:李从圣;王爱玲;杨静;郝玉瑜;郭增;

关键词:骨髓间充质干细胞;;胱硫醚-γ-裂解酶;;凋亡;;机制

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.01.008

〔摘 要〕 目的探讨胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)过表达保护低氧/无血清(H/SD)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡的机制。方法体外分离培养大鼠MSCs,利用H/SD诱导MSCs凋亡,构建CSE基因的慢病毒表达载体p LV-Zs Green-CSE lentivirus及空载体p LV-Zs Green lentivus并感染MCSs(分别记为CSEMSCs、GFPMSCs)。设立正常培养的MSCs(NormMSCs组)、CSEMSCs组、GFPMSCs组,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测CSE、Bcl-2、Bax及细胞色素c(Cyt c)蛋白的表达。结果与NormMSCs组及GFPMSCs组相比,CSE MSCs组CSE蛋白表达显著增高(P<0.01),在H/SD 12 h状态下,CSEMSCs组凋亡率显著降低(P<0.01),CSEMSCs组Bcl-2蛋白表达水平显著高于GFPMSCs组及NormMSCs组(P<0.01),CSEMSCs组Bax蛋白表达水平显著低于GFPMSCs组及NormMSCs组(P<0.01);CSEMSCs组线粒体Cyt c蛋白表达水平显著高于GFPMSCs组及NormMSCs组(P<0.01),CSEMSCs组胞质Cyt c蛋白表达水平显著低于GFPMSCs组及NormMSCs组(P<0.01)。NormMSCs与GFPMSCs组上述指标比较,差异均无统计学意义。结论 CSE过表达保护H/SD诱导MSCs凋亡,其机制与抑制线粒体凋亡途径有关。