基金项目: 河南省教育厅科学技术研究重点项目(编号:14B310002)
作者:牛朝霞;张秀芝;陈洁;杨红梅;王黎;裴瑞;
关键词:RNA干扰;;survivin;;侵袭与迁移;;Eca-109
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.02.008
〔摘 要〕 目的应用RNA干扰(RNAi)技术沉默食管癌细胞Eca-109内源性survivin的表达,探讨survivin基因在食管癌细胞侵袭与迁移过程中的作用。方法构建靶向survivin基因的siRNA表达载体并借助脂质体稳定转染食管癌细胞;Western blot检测survivin蛋白表达水平观察基因沉默效果,同法观察细胞内基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平的变化;Transwell小室法检测细胞侵袭能力的变化,细胞划痕实验观察细胞迁移能力的改变。结果与对照组相比,干扰组survivin蛋白表达水平明显降低,抑制率可达85%;干扰组细胞MMP2、MMP9和VEGF蛋白表达受到明显抑制(P<0.05),同时观察到干扰组细胞的侵袭与迁移能力也明显下降(P<0.05)。结论 survivin基因与食管癌细胞的侵袭迁移潜能相关,特异性沉默survivin基因可能通过下调MMP2、MMP9和VEGF的表达显著抑制食管癌细胞Eca-109的侵袭与迁移能力。