基金项目: 广西自然科学基金项目(编号:KY2012021);;广西科学实验中心开放课题项目(编号:KFJJ2011-11)
作者:秦贤杰;彭燕一;秦程;
关键词:血小板源性生长因子受体-α;;RNA干扰;;视网膜色素上皮细胞;;增殖;;凋亡
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.02.007
〔摘 要〕 目的探讨针对血小板源性生长因子受体-α(PDGFR-α)的RNA干扰对体外培养的人视网膜色素上皮(hRPE)细胞增殖和凋亡的影响,为临床治疗增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)提供实验依据。方法利用脂质体将合成的shRNA转染体外培养的hRPE细胞,MTT法检测hRPE细胞增殖活性;RT-PCR法检测细胞中PDGFR-αmRNA的表达;Western blot法检测PDGFR-α蛋白表达水平;Hoechst33258荧光染料核染分析细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率。结果 PDGFR-αshRNA作用hRPE细胞24~72 h后,细胞增殖明显受到抑制,呈时间剂量效应(P<0.05);PDGFR-αshRNA作用hRPE细胞48 h后,实验组PDGFR-α基因mRNA和蛋白的表达水平较空白对照组及阴性对照组明显降低(P<0.05);实验组细胞的凋亡率分别为(37.10±0.55)%、(50.8±1.41)%,与空白对照组(11.7±1.11)%及阴性对照组(13.5±1.05)%相比,差异有统计学意义(P<0.05);实验组G1期细胞百分比分别为(64.76±1.16)%、(75.64±0.93)%,与空白对照组(54.51±1.40)%及阴性对照组(56.04±2.19)%相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PDGFR-αshRNA能抑制hRPE细胞的增殖并诱导其凋亡。