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肌营养不良蛋白及其衍生物的表达与定位的研究

安徽医科大学学报 2015 09 v.50 1207-1210     字体:

基金项目: 国家自然科学基金青年基金(编号:81201368)

作者:钱成;王蓓华;徐雪琴;潘林鑫;李新颖;刘晓颖;范礼斌;

关键词:DAG1;;转染;;基因表达;;定位

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.09.001

〔摘 要〕 目的研究肌营养不良蛋白(DG)及其衍生物α-DG、β-DG在真核细胞内的表达与定位。方法构建pcDNA3.1-DAG1-FLAG、pcDNA3.1-DAG1α-FLAG和pcDNA3.1-DAG1β-FLAG 3个真核表达质粒,并分别转染至HEK 293T细胞中;提取总蛋白,Western blot检测表达情况;分别转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察细胞定位情况。结果成功构建了带有DAG1、DAG1α、DAG1β基因的真核表达载体,且在HEK 293T细胞中都能有效表达,在COS7细胞中主要分布于细胞质。结论DG及其衍生物α-DG、β-DG在HEK293T、COS7细胞中均有表达,主要分布在细胞质内,为进一步了解DAG1的功能提供了细胞学基础。