刘佳;王佑民;胡红琳;冯双双;
摘要:
目的研究全长脂联素(Acrp30)在人乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、自噬、凋亡中的作用,并探讨自噬与凋亡的关系。方法体外培养MCF-7细胞,分为对照组(未加入Acrp30)、加药组(25、50、100、200 ng/ml Acrp30),四亚基偶氮唑盐(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况。选取100 ng/ml Acrp30浓度组(Acrp组)作用MCF-7细胞,进行培养,倒置显微镜观察细胞形态、贴壁情况;划痕抑制试验了解细胞迁移能力;Western blot法评价细胞自噬水平;流式细胞仪检测Acrp组及3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理组不同时间细胞的总凋亡率。结果 1 MTT结果显示:与对照组相比,50、100 ng/ml组72 h,200 ng/ml组48、72 h可显著抑制MCF-7细胞增殖(P<0.05);2划痕抑制实验结果显示:与对照组相比,Acrp30组作用48、72 h,迁移距离显著减小(P<0.01);3 Western blot结果显示:与对照组相比,Acrp30组自噬水平(LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值)24、48 h显著提高(P<0.05,P<0.01),但随时间延长,比值逐渐下降,作用72 h后LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值有所升高但差异无统计学意义;4流式细胞仪检测凋亡率结果显示:与对照组相比,Acrp30组和干预组48、72 h总凋亡率明显增加(P<0.05,P<0.01),与Acrp30组相比干预组72 h凋亡率显著升高(P<0.05)。结论Acrp30可抑制MCF-7细胞的增殖和迁移,诱导细胞的自噬和凋亡;抑制细胞自噬可促进Acrp30对MCF-7细胞凋亡的诱导。