基金项目: 国家自然科学基金(编号:81202631)
作者:陈莹莹;吴继雄;王靓;何非;
关键词:H9C2细胞株;;缺氧/复氧损伤;;Ghrelin;;凋亡
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.08.004
〔摘 要〕 目的探讨Ghrelin预处理对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法培养H9C2心肌细胞并建立心肌细胞缺氧(21 h)/复氧(6 h)模型。细胞随机分成4组:对照组,缺氧/复氧组(H/R组),缺氧/复氧+Ghrelin组(H/R+G组),缺氧/复氧+Ghrelin+生长激素促分泌素受体(GHSR)-siRNA组(H/R+G+G-siRNA组);采用siRNA干扰技术阻断Ghrelin受体GHSR的表达以及Hoechst 33258染色剂和流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组凋亡相关蛋白表达情况。结果 GHSR存在于正常H9C2心肌细胞中,GHSR-siRNA可以显著抑制H9C2心肌细胞中GHSR的表达。与H/R组相比,在H/R+G组中缺氧/复氧损伤所导致心肌细胞的凋亡率明显下降(P<0.05),B淋巴细胞瘤-2蛋白/Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2/Bax)比率明显上调(P<0.05),含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)表达水平被显著抑制(P<0.05)。而与H/R+G组相比,H/R+G+G-siRNA组心肌细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比率显著下降(P<0.05),caspase-3表达上调(P<0.05)。结论 Ghrelin具有减轻缺氧/复氧所引起的心肌细胞损伤、抑制心肌细胞凋亡的作用。