基金项目: 国家自然科学基金(编号:81101849/H1617)
作者:苏娇娇;冯慧;姚玮艳;陈熹;张辰宇;王亚雷;
关键词:胰腺癌;;癌相关成纤维细胞;;miRNAs;;迁移
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.04.005
〔摘 要〕 目的观察胰腺癌细胞系BXPC-3、SW1990能否促进其基质中正常成纤维细胞(NFs)活化成癌相关成纤维细胞(CAFs)及其活化的可能机制,以及活化后的CAFs对BXPC-3、SW1990细胞迁移能力的影响。方法采用差异贴壁法分选出野生型小鼠C57胰腺组织中的NFs,后运用非接触式共培养方法将BXPC-3、SW1990与NFs共培养,共培养后采用免疫荧光方法检测共培养前后NFs中CAFs标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)的表达变化,以确定其是否活化,并且运用qRT-PCR法检测目前较公认的胰腺癌中升高的12种miRNAs在共培养前后的NFs中含量变化;采用transwell法观察活化前后的NFs对BXPC-3、SW1990迁移能力的影响。结果免疫荧光检测表明,与BXPC-3、SW1990共培养后,NFs中α-SMA、FAP表达均显著升高;同时,在所选取的12种miRNAs中,与BXPC-3、SW1990共培养后,NFs中miR-155含量均有明显升高。BXPC-3、SW1990在CAFs基质环境中迁移能力大大提高。结论胰腺癌细胞能够促进其周围NFs活化成CAFs,其活化可能与胰腺癌中某些特定的miRNA分泌进入到NFs中有关,活化后的CAFs又可以反过来促进胰腺癌细胞的迁移。