安徽医科大学学报
2014 06 v.49 706-710
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基金项目: 国家自然科学基金面上项目(编号:81270082、81170030);;教育部高等学校博士学科点专项科研基金(编号:20113420110006);;安徽省科技攻关项目(编号:12010402135);;重点实验室计划项目(编号:1206c0805028)
作者：吕允相;吴惠梅;方磊;刘荣玉;
关键词：吞噬;;自噬;;巨噬细胞;;磷脂酰肌醇3激酶;;金黄色葡萄球菌
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2014.06.002
〔摘 要〕 目的探讨金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)对巨噬细胞自噬的影响,并研究其在巨噬细胞吞噬病原微生物中的作用。方法以小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7为研究对象,以磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)为干预药物,空白处理作为对照组,金葡菌感染作为实验组,3-MA干预作为抑制组。金葡菌感染细胞后,Western blot检测自噬蛋白Beclin1、LC3以及吞噬相关蛋白Rac1的表达,激光共聚焦显微镜观察自噬、吞噬现象。结果金葡菌感染RAW264.7 1 h后,实验组LC3Ⅱ和PI3K蛋白表达最强(P<0.05),抑制组Beclin1和LC3Ⅱ表达显著降低(P<0.05),自噬颗粒聚集显著减少(P<0.05),Rac1表达显著降低(P<0.05),同时,RAW264.7吞噬金葡菌数目显著减少(P<0.05)。结论金葡菌诱导的自噬增强了巨噬细胞吞噬能力,自噬抑制剂3-MA抑制PI3K活性的同时,减弱了巨噬细胞自噬吞噬金葡菌的能力。